Journal of Rafsanjan University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان
JRUMS
Medical Sciences
http://journal.rums.ac.ir
69
journal69
1735-3165
2008-7268
10.66224/jrums
fa
jalali
1381
3
1
gregorian
2002
6
1
1
2
online
1
fulltext
other
تعیین جهش در اگزونهای شماره 5 و 8 ژن 53 P در مبتلایان به سرطان پستان فامیلی
با روش غیر رادیواکتیو PCR-SSCP
Detection of P 53 gene mutations in exons 5 and 8 in patients of familial breast cancer with PCR-SSCP methode.
بیوشیمی
Biochemistry
پژوهشي
Research
<span style="font-family:Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف: </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> سرطان پستان شایعترین سرطان زنان در دنیا میباشد و تغییرات ژنتیکی متنوعی را میتوان در آن مشاهده کرد یکی از شایعترین این تغییرات جهش در ژن </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;"> 53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> است. این ژن یکی از مهمترین مهارکنندههای تومور میباشد و پروتئین مزبور ( </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;">53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">) در بسیاری از اعمال سلول نقش دارد. این ژن شامل 11 اگزون است که اگزونهای چهارگانه 5 تا 8 نواحی مرکزی پروتئین که عملکرد </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;">53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> را بعهده دارد راکد میکنند لذا جهشهای این اگزونها از اهمیت بیشتری برخوردار بوده و باعث غیرفعال شدن یا سوء عملکرد این پروتئین میگردند. </span></span><br>
<span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> تعیین جهشهای این ژن کمک بزرگی در شناخت مکانیسم ژنتیکی شروع و پیشرفت سرطان پستان و در نتیجه تشخیص و درمان به موقع این سرطان میباشد. که هدف این مطالعه نیز تعیین جهشهای </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;"> 53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">در دو اگزون شماره 5 و 8 این ژن بوده است. </span></span><br>
<span style="font-family:Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روشها: </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> در این مطالعه 32 بیمار مبتلا به سرطان پستان فامیلی که تحت عمل بیوپسی پستان قرار گرفته بودند مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br>
<span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">DNA</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> با روش فنل - کلروفرم، انجام و پس از تعیین درجه خلوص با روش اسپکتروفتومتری، جهت تکثیر اگزونهای شماره 5 و 8 از روش (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">polymerase chain reaction) PCR</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> استفاده گردید، با روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">SSCP</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> ، (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">single</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">strand conformation polymorphism</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">) که روش معمول تعیین جهش برای ژن </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;">53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> میباشد محصولات تک رشتهای (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">Single strand</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">) اگزونهای مزبور در ژل پلیاکریل آمید الکتروفورز و توسط روش نیترات نقره رنگآمیزی گردید نهایتاً تغییرات حرکتی باندهای حاصله با نمونه کنترل (طبیعی) مقایسه و مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.</span></span><br>
<span style="font-family:Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یافتهها: </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> پس از آنالیز ژلهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">SSCP</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> و مقایسه حرکت باندهای حاصله در ژل با نمونه کنترل، در اگزون شماره 5 دو مورد و در اگزون شماره 8 چهار مورد جهش تعیین گردید. </span></span><br>
<span style="font-family:Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجهگیری: </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">در این مطالعه به علت محدود بودن تعداد بیماران و محدودیت زمان انجام تحقیق تنها جهشهای ژن </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;">53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"> در دو اگزون شماره 5 و 8 بیماران مبتلا به سرطان پستان فامیلی بررسی شد لذا پیشنهاد میگردد، این جهشها در دیگر اگزونها و در مقیاس بزرگتر بررسی گردد تا اولاً کدونهائی که بیشترین درصد جهش را دارا هستند شناسایی شوند و ثانیاً ارتباط این جهشها و مراحل مختلف سرطان پستان و به دنبال آن استفاده کلینیکی نتایج حاصل گردد. </span></span><br>
<em><span style="font-family:Zar;"><span style="font-size:13.0pt;">واژههای کلیدی: </span></span></em><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">سرطان پستان، جهش، ژن </span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:12.0pt;">53 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span> <span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">PCR-SSCP</span></span><span style="font-family:Yas;"><span style="font-size:13.0pt;"></span></span>
Background: Breast cancer is one of the most common cancer of women in the world. Although different genetic alteration has been reported in this malignancy, but P 53 gene mutations has more frequency. P 53 gene is one of the most important suppressor genes and it play a central role in breast cancer and detecting of mutations in this gene would be very helpful in understanding of genetic mechanisms in intiation and progress of this cancer.<br>
Materials - Methods: 32 patients with familial breast cancer were selected and biopsy of breast as sample were studied. DNA extraction were performed by phenol-chloroform method and polymerase chain reaction (PCR) for amplification of exons 5 and 8 were carried out. Inorder to detection of mutations SSCP (single strand conformation polymorphism) method was used and SSCP polyachrilamid gels were staind by silver nitrate. Abnormal band incompare with controls were selected as matation.<br>
Results: 2 mutations in exon 5 and 4 mutations in exon 8 were detected by analysing of SSCP gels. There were not found any statistical differences relationship between breast cancer and different tumour establisher agents.<br>
Discussion: Mutation of P 53 gene has been known as starter of breast cancer in the different population. In some area mutation of P 53 gene is cause of breast cancer with 80%<br>
frequency.<br>
Due to some limitation in our study, such as: number of patients and exons that were studied, could not conclude an exact interpretation between P 53 gene mutation and breast cancer.<br>
In order to reveal dominant P 53 gene mutations in iranian people, we recommend to perform this study on more patients with breast cancer and all exons of P 53 gene in Iran.<br>
<br>
Key words: <strong>Breast cancer, P53 gene, Mutation, PCR-SSCP </strong>
سرطان پستان, جهش, ژن 53 P , PCR-SSCP
Breast cancer, P53 gene, Mutation, PCR-SSCP
113
125
http://journal.rums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-506-117&slc_lang=other&sid=1
محمدرضا
میرزایی
6900319475328460038508
6900319475328460038508
Yes
پروین
مهدیپور
6900319475328460038509
6900319475328460038509
No
مرتضی
عطری
6900319475328460038510
6900319475328460038510
No
حسین
تیموری
6900319475328460038511
6900319475328460038511
No
غلامرضا
اسدی
6900319475328460038512
6900319475328460038512
No