میرزایی محمدرضا، مهدیپور پروین، عطری مرتضی، تیموری حسین، اسدی غلامرضا. تعیین جهش در اگزونهای شماره 5 و 8 ژن 53 P در مبتلایان به سرطان پستان فامیلی
با روش غیر رادیواکتیو PCR-SSCP. مجله دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان. 1381; 1 (2) :113-125
URL: http://journal.rums.ac.ir/article-1-5446-fa.html
چکیده: (1445 مشاهده)
زمینه و هدف: سرطان پستان شایعترین سرطان زنان در دنیا میباشد و تغییرات ژنتیکی متنوعی را میتوان در آن مشاهده کرد یکی از شایعترین این تغییرات جهش در ژن 53 P است. این ژن یکی از مهمترین مهارکنندههای تومور میباشد و پروتئین مزبور ( 53 P ) در بسیاری از اعمال سلول نقش دارد. این ژن شامل 11 اگزون است که اگزونهای چهارگانه 5 تا 8 نواحی مرکزی پروتئین که عملکرد 53 P را بعهده دارد راکد میکنند لذا جهشهای این اگزونها از اهمیت بیشتری برخوردار بوده و باعث غیرفعال شدن یا سوء عملکرد این پروتئین میگردند.
تعیین جهشهای این ژن کمک بزرگی در شناخت مکانیسم ژنتیکی شروع و پیشرفت سرطان پستان و در نتیجه تشخیص و درمان به موقع این سرطان میباشد. که هدف این مطالعه نیز تعیین جهشهای 53 P در دو اگزون شماره 5 و 8 این ژن بوده است.
مواد و روشها: در این مطالعه 32 بیمار مبتلا به سرطان پستان فامیلی که تحت عمل بیوپسی پستان قرار گرفته بودند مورد بررسی قرار گرفت.
استخراج DNA با روش فنل - کلروفرم، انجام و پس از تعیین درجه خلوص با روش اسپکتروفتومتری، جهت تکثیر اگزونهای شماره 5 و 8 از روش (polymerase chain reaction) PCR استفاده گردید، با روش SSCP ، (single strand conformation polymorphism) که روش معمول تعیین جهش برای ژن 53 P میباشد محصولات تک رشتهای (Single strand) اگزونهای مزبور در ژل پلیاکریل آمید الکتروفورز و توسط روش نیترات نقره رنگآمیزی گردید نهایتاً تغییرات حرکتی باندهای حاصله با نمونه کنترل (طبیعی) مقایسه و مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
یافتهها: پس از آنالیز ژلهای SSCP و مقایسه حرکت باندهای حاصله در ژل با نمونه کنترل، در اگزون شماره 5 دو مورد و در اگزون شماره 8 چهار مورد جهش تعیین گردید.
نتیجهگیری: در این مطالعه به علت محدود بودن تعداد بیماران و محدودیت زمان انجام تحقیق تنها جهشهای ژن 53 P در دو اگزون شماره 5 و 8 بیماران مبتلا به سرطان پستان فامیلی بررسی شد لذا پیشنهاد میگردد، این جهشها در دیگر اگزونها و در مقیاس بزرگتر بررسی گردد تا اولاً کدونهائی که بیشترین درصد جهش را دارا هستند شناسایی شوند و ثانیاً ارتباط این جهشها و مراحل مختلف سرطان پستان و به دنبال آن استفاده کلینیکی نتایج حاصل گردد.
واژههای کلیدی: سرطان پستان، جهش، ژن 53 P ، PCR-SSCP
نوع مطالعه:
پژوهشي |
موضوع مقاله:
بیوشیمی دریافت: 1399/3/25 | پذیرش: 1399/3/25 | انتشار: 1399/3/25